Полученную крупнозернистую взвесь повторно измельчают еще 2-3 раза с промыванием после каждого измельчения раствором Хенкса (без индикатора) с антибиотиком и средой 199 (с феноловым красным). Образовавшуюся мелкозернистую гомогенную массу (в виде манной крупы) переносят в матрасные колбы и заливают 120 мл среды для культивирования 199 с 10 % сыворотки плодов крупного рогатого скота и раствором антибиотика в дозе 100 мкг/мл. Культивирование проводят в термостате при температуре плюс 37°С. Каждые 2-3 дня выполняют смену культуральной среды. На 3-4 сутки переносят колбы в термостат с температурой плюс 24°С. По истечении 7-8 суток культура пригодна для трансплантации. В процессе культивирования забирают часть материала для гистологического и бактериологического исследования, культуральную жидкость исследуют на содержание С-пептида и инсулина. Помутнение культуральной среды, изменение ее рН, а также образование пузырьков газа или явный визуальный рост колоний говорят о бактериальной загрязнении и гибели культуры, что делает ее использование недопустимым.

Показания к применению
1. Инсулинзависимый сахарный диабет (длительность заболевания не менее 5 лет):
лабильное течение заболевания;
дистальная нейропатия различной степени выраженности;
диабетическая нефропатия в доклинической и пренефроти-ческой стадиях;
пролиферативная диабетическая ретинопатия;
диабетическая ангиопатия нижних конечностей в функциональной, - органической и язвенно-некротической стадиях.
2. Инсулиннезависимый сахарный диабет:
инсулинопотребление;
диабетическая ангиопатия нижних конечностей в функциональной, - органической и язвенно-некротической стадиях.
3. Панкреатогенный сахарный диабет.

Макроинкапсуляция Я клеток, как метод иммуноизоляции с имплантацией трансплантата в сосудистое русло, позволяет без иммуно супрессивной терапии преодолеть иммунологический барьер, реакции острого и хронического отторжения, являющихся главной причиной неудач клеточной трансплантации. Как иммунологически привилегированная зона, сосудистое русло является наиболее привлекательным «местообитанием» трансплантата.
Таким образом метод свободной алло- и ксенотрансплантации культуры островковых клеток поджелудочной железы по поводу сахарного диабета прочно вошел в клиническую практику и по выражению В.И. Шумакова «...в ближайшие годы станет неотъемлемой органической частью современной комплексной диабетологии». Наряду с этим, эта проблема несет в себе еще ряд неразъясненных вопросов, которые были сформулированы В.И. Шумаковым с соавт.:
1. Почему длительность антидиабетического эффекта свободной трансплантации культуры островковых клеток ограничена 1-1,5 годами, а в ряде случаев угасание эффекта наблюдается значительно раньше?